产品货号:
JN5021
中文名称:
探针法qPCR SuperMix(UNG酶,无甘油)
英文名称:
2×BalbStart Probe qPCR SuperMix
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一款是采用TaqMan探针法进行Real-Time PCR的试剂;本制品是将热启动Taq DNA聚合酶、UDG酶、优化的反应Buffer、dNTPs、保护剂及赋形剂等试剂预混制成液体试剂,液体试剂中不含甘油及其他影响冻干的成分,可直接用于冻干样品的制备,以提高样品的稳定性和易用性。进行实验时,加入引物、探针、模板、水即可配制完成PCR反应液。
制剂中引入dUTP/UDG防污染系统,可有效去除体系中存在的污染物,同时当反应体系升温至90~95℃,UDG酶彻底失活,可维持cDNA完整性。本制品可加入多对引物,在单个反应孔中针对多个基因进行多重的荧光定量PCR反应。
本制品采用特殊工艺制备的HotStartTaq DNA聚合酶并结合特别优化的反应及冻干配方制成的可冻干液体试剂,能有效抑制非特异性反应,提高了反应特异性和扩增效率,能够在更广的范围内进行准确定量。并配有不同浓度的ROX Reference Dye,用于不同仪器校正孔间荧光信号误差。

- 该产品可用于制作冻干粉或冻干小球,可添加引物探针进行冻干;
- 高特异性:采用特殊工艺制备的HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性;
- 高效:精心配制的Real-Time PCR专用2×SuperMix,具有更高扩增效率和扩增灵敏度;
- 快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。

组分 | 5mL | 25mL |
2×BalbStart Probe qPCR SuperMix(UNG) | 5mL | 25mL |
RNase-Free Water | 5mL | 25mL |
ROX I | 200μL | 1mL |
ROX II | 200μL | 1mL |
保存:-20℃

纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留。

- 反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。
- 引物设计:一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好,一般为200bp以下。

- 使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
- qPCR灵敏度高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20~35之间适宜。
- 本制品中已含有冻干辅料,若需增加其他冻干辅料,需根据实际检测数据评估后增加。
- 复溶后产品使用若有剩余,请将本制品置于-20℃储存,尽量避免反复冻融,影响产品使用。

- 冻干粉样品制备及使用
- 将2×BalbStart Probe qPCR SuperMix(UNG)根据需求进行冻干样品制备;
- 将冻干制备后的样品加入RNase-Free Water进行溶解即可使用;溶解后的剩余试剂置于-20℃保存,尽量避免多次反复冻融。
- 将2×BalbStart Probe qPCR SuperMix(UNG)根据需求进行冻干样品制备;
- 冻干小球体系制备
- 根据以下常用体系进行冻干小球体系配制(20μL)
成分 用量 2×BalbStart Probe qPCR SuperMix(UNG) 10μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 探针(10μM) 0.4μL RNase-Free Water 至20μL - 将上述液体样品进行冻干;
- 冻干后样品依据下述表格进行复溶:
注:其中X为模板和ROX(需根据机器型号选择)加量成分 用量 冻干小球 1颗 RNase-Free Water (20-X)μL - 确保样品已完全溶解后,加入模板和ROX(需根据机器型号选择)后进行PCR反应。
- 根据以下常用体系进行冻干小球体系配制(20μL)
- 常用PCR循环
反应阶段 循环数 温度 时间 污染消化 1 50℃ 2min 预变性 1 95℃ 5min 变性 45~50 95℃ 10s 退火/延伸 60℃ 40s

附录1:根据PCR仪选择使用ROX
- 用ROX I校准的Real Time PCR仪有:
ABI 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;ABI StepOne/StepOnePlus及其他仪器。 - 用ROX II校准的Real Time PCR仪有:
ABI 7500/7500 Fast;ABI ViiA7;ABI Q6;ABI Quant Studio 6/7 Flex;Stratagene MX4000/MX3005P/MX3000P及其他仪器。 - 不需要用ROX校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/iQ/My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon 2/Chromo4;Eppendorf Mastercycler ep realplex/realplex 2s;Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;Roche Applied Science LightCycler 480;Thermo Scientific PikoReal Cycler;Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/Rotor-Gene 6000及其他仪器。
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